安徽省皖北五校2024届高三第二次五校联考生物答案

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20.（10分)毛角蛋白Ⅱ型中间丝(KFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转K1Fn基因的高绒质绒山羊的简单流程如图所示。回答下列问题：人F1基因①重组表达载体人③导入日的基因的成纤维细胞手胎儿皮肤组织块②成纤维细胞重组细胞④早期胚胎代孕母羊一一转基因绒山羊成年母绒山羊一卵（母）细胞去核(1)通过过程①构建重组表达载体时，需要将KIFⅡ基因连接在与之间才能使基因得以表达，将构建好的表达载体导入成纤维细胞最常用的方法是(2)在过程②中，用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理皮肤组织块，其目的是然后制成细胞悬液，置于培养瓶中培养，成纤维细胞沉降到瓶底后先后会出现和现象。(3)如果要提高胚胎的利用率，可对过程④获得的处于囊胚阶段的早期胚胎进行号处理，进行操作时需要注意的事项是(4)经检测，KIFI基因已成功导入绒山羊中，现欲检测KIFⅡ基因在转基因绒山羊中是否学成功表达，需要进行分子水的检测，检测的步骤是21.(11分)Cú+胁迫对转基因水稻根际土壤微生物有重要影响。某研究小组以苏云金杆菌的焙B1毒蛋白基因为目的基因，获得转基因水稻新品种，并用其研究Cu+胁迫对抗虫转基因水云稻根际土壤微生物群落结构的影响。目的基因及引物如图1所示，载体和目的基因的结构如图2所示，其中箭头所指的为限制酶切割位点。回答下列有关问题：BamH I5'工I3'HindⅢ目的基因一一外源DNA引物A引物B-Pst I屈引物DAmpBamH I引物C注：neoR为卡那霉素抗性基因，AmpR为氨苄青霉素抗性基因。3'工Πs呀图2图1(1)为获得大量的目的基因，可以用PCR技术进行扩增，该过程所用的酶是,用PC℉技术进行扩增前需要根据目的基因两端已知的序列合成引物，扩增过程中应选择?(填字母)。引物是一小段能与互补配对的(2)科研人员通过设计引物，可在PCR特异性扩增目的基因时，使目的基因两端分别加人不图1中的引物同的限制酶识别序列，进而使目的基因能够与载体正确连接，成功构建基因表达载体。为了实现上述目的，用于扩增目的基因的两种引物应分别具有和限制酶识别序列。(3)可用农杆菌转化法将目的基因导入水稻受体细胞，依据农杆菌的侵染特点，目的基因应上，经过农杆菌的转化作用，进人水稻细胞，并将其整合到,从插入而使其得以维持稳定和表达。(4)若用PCR检测目的基因是否成功导入受体细胞中，则实验组应以待测的样本DNA为为模板的组别作模板，使用目的基因的特异性引物进行PCR扩增，同时将以为阳性对照组，将以非目的基因片段为模板的组别作为阴性对照组。·24-497B·【高二生物学第6页（共6页】2024.05.1011:43